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人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒

人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒
elisa檢測試劑盒不需要任何分離步驟,操作十分簡便、快速,數(shù)分鐘便能得出結(jié)果,酶免疫測定方法操作時(shí),所有反應(yīng)試劑均在同一體系內(nèi)進(jìn)行,自主研發(fā)和銷售多年,對ELISA試劑盒這方面的研究越來越專業(yè),小至成本,大至數(shù)據(jù),幫助許多科研人士完成實(shí)驗(yàn)。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2023-02-21
  • 訪  問  量:4963
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聯(lián)系電話:0755-28019324

產(chǎn)品詳情
品牌其他品牌貨號RQ-FW0354A
規(guī)格96T/48T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研試驗(yàn)品牌瑞清
方法競爭法、夾心法、間接法檢測樣本血清.血漿.組織.相關(guān)液體等
檢測種屬人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細(xì)胞,土壤等動(dòng)植物產(chǎn)品優(yōu)勢靈敏性高特異性強(qiáng)

人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒



檢測原理

試劑盒采用雙抗原一-步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 。往預(yù)先包被病毒性腹瀉病毒ti的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗原,經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在suan的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450NM波長下測定吸光度(OD) ,與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中豬病毒性腹瀉病毒(BVDV) 的存在與否。

樣品收集、處理及保存方法

1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.血漿: EDTA、檸檬suan鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.細(xì)胞上清液: 3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn) 離心10分鐘取上清。

5.保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按次用量分裝,凍存于-20°C, 避免反

復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


自備物品

1.酶標(biāo)儀(450NM)

2.高精度加樣器及槍頭: 0.5-10UL、 2-20UL20-200UL、 200-1000UL

3.37恒溫箱

操作注意事項(xiàng)

1.試劑盒保存在2-8°C,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完quan溶解后再使用。

2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.預(yù)處理后的樣本請按照操作步驟用樣ben稀釋ye適當(dāng)稀釋以達(dá)到試劑盒的的jia檢測效果。.

4.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5.所有液體組分使用前充分搖勻。

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人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒

常用方法:

1. 夾心法:

夾心法常用于檢測大分子抗原,一般的操作步驟為:

a. 將具有專一性的ti固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余ti

b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會(huì)與塑膠孔盤上的ti進(jìn)行專一性鍵結(jié)

c. 洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次ti,與待測抗原進(jìn)行鍵結(jié)

d. 洗去多余未鍵結(jié)一次ti,加入帶有酶的二次ti,與一次ti鍵結(jié)

e. 洗去多余未鍵結(jié)二次ti,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果

原理:針對抗原分子上2個(gè)不同抗原決定簇的單克隆ti分別作為固相ti和酶標(biāo)ti,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物。

2. 間接法

間接法常用于檢測ti,一般的操作步驟為:

a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次ti,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)。

c. 洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次ti,與待測的一次ti鍵結(jié)。

d. 洗去多余未鍵結(jié)二次ti,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測ti的含量。

原理:利用酶標(biāo)記的抗ti以檢測已與固相結(jié)合的受檢ti


3. 競爭法

競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機(jī)制,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:

a. 將具有專一性的ti固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余ti

b. 加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的ti進(jìn)行專一性鍵結(jié)

c. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的ti進(jìn)行專一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤上固著的ti數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著ti就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上ti鍵結(jié),即所謂競爭法之由來。

d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。

e. 當(dāng)需要偵測無法獲得兩種以上單一性ti的抗原,或是不易得到足夠的純化ti以固著于孔盤上時(shí),一般會(huì)考慮使用競爭法ELISA。

標(biāo)本要求 :

1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控

制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于

標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍) 后再測定,計(jì)算時(shí)請

后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

深圳瑞清生物信息科技有限公司的產(chǎn)品在相當(dāng)寬的領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用,長期和各大高校、研究機(jī)構(gòu)、工廠、企業(yè)等建立了深厚的合作關(guān)系,我們的企業(yè)文化是為樹立行業(yè)的地位而不懈努力,為科研事業(yè)貢獻(xiàn)綿薄之力!公司的核心價(jià)值是誠信為本,為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品、為員工提供發(fā)展平臺(tái)、為社會(huì)創(chuàng)造更多價(jià)值。

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